ფლუორესცენტულმა მიკროსკოპმა მოახდინა რევოლუცია ჩვენს უნარში ვიზუალიზაციისა და ბიოლოგიური ნიმუშების შესწავლისა, რაც საშუალებას გვაძლევს ჩავუღრმავდეთ უჯრედებისა და მოლეკულების რთულ სამყაროს. ფლუორესცენტული მიკროსკოპის ძირითადი კომპონენტია სინათლის წყარო, რომელიც გამოიყენება ნიმუშის შიგნით ფლუორესცენტური მოლეკულების გასაღვიძებლად. წლების განმავლობაში გამოიყენებოდა სინათლის სხვადასხვა წყარო, თითოეულს თავისი უნიკალური მახასიათებლები და უპირატესობები.
1. მერკური ნათურა
მაღალი წნევის ვერცხლისწყლის ნათურა, 50-დან 200 ვატამდე, აგებულია კვარცის მინის გამოყენებით და სფერული ფორმისაა. ის შეიცავს ვერცხლისწყლის გარკვეულ რაოდენობას შიგნით. როდესაც ის მუშაობს, გამონადენი ხდება ორ ელექტროდს შორის, რაც იწვევს ვერცხლისწყლის აორთქლებას და სფეროს შიდა წნევა სწრაფად იზრდება. ამ პროცესს, როგორც წესი, დაახლოებით 5-დან 15 წუთამდე სჭირდება.
მაღალი წნევის ვერცხლისწყლის ნათურის გამოსხივება ხდება ელექტროდის გამონადენის დროს ვერცხლისწყლის მოლეკულების დაშლისა და შემცირების შედეგად, რაც იწვევს სინათლის ფოტონების გამოყოფას.
ის ასხივებს ძლიერ ულტრაიისფერ და ლურჯ-იისფერ შუქს, რაც მას შესაფერისს ხდის სხვადასხვა ფლუორესცენტური მასალის ამაღელვებლად, რის გამოც იგი ფართოდ გამოიყენება ფლუორესცენტულ მიკროსკოპში.
2. ქსენონის ნათურები
ფლუორესცენტულ მიკროსკოპში თეთრი სინათლის კიდევ ერთი გავრცელებული წყაროა ქსენონის ნათურა. ქსენონის ნათურები, ისევე როგორც ვერცხლისწყლის ნათურები, უზრუნველყოფენ ტალღის სიგრძის ფართო სპექტრს ულტრაიისფერიდან ახლო ინფრაწითელამდე. თუმცა, ისინი განსხვავდებიან აგზნების სპექტრით.
ვერცხლისწყლის ნათურები კონცენტრირებენ თავიანთ ემისიას თითქმის ულტრაიისფერ, ლურჯ და მწვანე რეგიონებში, რაც უზრუნველყოფს კაშკაშა ფლუორესცენტური სიგნალების წარმოქმნას, მაგრამ გააჩნია ძლიერი ფოტოტოქსიკურობა. შესაბამისად, HBO ნათურები, როგორც წესი, რეზერვირებულია ფიქსირებული ნიმუშებისთვის ან სუსტი ფლუორესცენტული გამოსახულების მისაღებად. ამის საპირისპიროდ, ქსენონის ნათურის წყაროებს აქვთ უფრო გლუვი აგზნების პროფილი, რაც იძლევა ინტენსივობის შედარების საშუალებას სხვადასხვა ტალღის სიგრძეზე. ეს მახასიათებელი ხელსაყრელია ისეთი პროგრამებისთვის, როგორიცაა კალციუმის იონის კონცენტრაციის გაზომვები. ქსენონის ნათურები ასევე ავლენენ ძლიერ აგზნებას ახლო ინფრაწითელ დიაპაზონში, განსაკუთრებით დაახლოებით 800-1000 ნმ.
XBO ნათურებს აქვთ შემდეგი უპირატესობები HBO ნათურებთან შედარებით:
① უფრო ერთგვაროვანი სპექტრული ინტენსივობა
② უფრო ძლიერი სპექტრული ინტენსივობა ინფრაწითელ და შუა ინფრაწითელ რეგიონებში
③ მეტი ენერგიის გამომუშავება, რაც აადვილებს ობიექტის დიაფრაგმის მიღწევას.
3. LED-ები
ბოლო წლების განმავლობაში, ახალი კონკურენტი გაჩნდა ფლუორესცენტული მიკროსკოპის სინათლის წყაროების სფეროში: LED-ები. LED-ები გვთავაზობენ სწრაფი ჩართვა-გამორთვის უპირატესობებს მილიწამებში, ამცირებენ ნიმუშის ექსპოზიციის დროს და ახანგრძლივებენ დელიკატური ნიმუშების სიცოცხლის ხანგრძლივობას. გარდა ამისა, LED შუქი ავლენს სწრაფ და ზუსტ დაშლას, რაც მნიშვნელოვნად ამცირებს ფოტოტოქსიკურობას ხანგრძლივი ცოცხალი უჯრედების ექსპერიმენტების დროს.
თეთრი სინათლის წყაროებთან შედარებით, LED-ები ჩვეულებრივ ასხივებენ აგზნების უფრო ვიწრო სპექტრში. თუმცა, ხელმისაწვდომია მრავალი LED ზოლი, რაც იძლევა მრავალფეროვან მრავალფეროვან ფლუორესცენციულ აპლიკაციებს, რაც LED-ებს სულ უფრო პოპულარულ არჩევანს აქცევს თანამედროვე ფლუორესცენტული მიკროსკოპის კონფიგურაციაში.
4. ლაზერული სინათლის წყარო
ლაზერული სინათლის წყაროები უაღრესად მონოქრომატული და მიმართულია, რაც მათ იდეალურად აქცევს მაღალი გარჩევადობის მიკროსკოპისთვის, მათ შორის სუპერ გარჩევადობის ტექნიკას, როგორიცაა STED (სტიმულირებული ემისიის ამოწურვა) და PALM (ფოტოაქტივირებული ლოკალიზაციის მიკროსკოპია). ლაზერული შუქი, როგორც წესი, შეირჩევა იმისთვის, რომ შეესაბამებოდეს სამიზნე ფტორფორისთვის საჭირო აგზნების ტალღის სიგრძეს, რაც უზრუნველყოფს ფლუორესცენციის აგზნების მაღალ სელექციურობას და სიზუსტეს.
ფლუორესცენტული მიკროსკოპის სინათლის წყაროს არჩევანი დამოკიდებულია კონკრეტულ ექსპერიმენტულ მოთხოვნებზე და ნიმუშის მახასიათებლებზე. გთხოვთ, მოგერიდებათ დაგვიკავშირდეთ, თუ რაიმე დახმარება გჭირდებათ
გამოქვეყნების დრო: სექ-13-2023